5L liên tục dòng chảy nhiệt siêu âm Homogenizer Sonicator

Ứng dụng của siêu âm Homogenizer Sonicator trong Streptomyces

Q: các điều kiện cho streptomyces ultrasonication là gì?

A: Pre-điều trị thường được cấu hình như một nồng độ của hệ thống treo vi khuẩn. Siêu âm bị gián đoạn được thực hiện bằng cách sử dụng một máy nghiền bột siêu âm. Các điều kiện cụ thể được thông qua tại thời điểm này như sau:

1. Môi trường nuôi cấy 24 giờ vi khuẩn được ly tâm ở mức 5 000 r / phút trong 5 phút để thu thập các tế bào.

2. Rửa 3 lần bằng dung dịch đệm Na2HPO-NaH2PO pH 7,5, sau đó trộn vi khuẩn vào huyền phù 1: 3 với bộ đệm này. Đặt trong một ống nghiệm nhựa lớn 40 ml.

3. Đặt ống nghiệm nhựa lớn trong bồn đá và sử dụng siêu âm để ngắt (công suất 200 W, 1/2 "dò, nghiền trong 30 giây, liên tục 30 S).

4. Chất lỏng đã nghiền được ly tâm ở tốc độ 12 000 r / phút trong 30 phút ở tốc độ cao để thu thập các mảnh vỡ tế bào và nổi trên bề mặt. Các thủ tục gián đoạn siêu âm về cơ bản giống như trên, đó là, các tế bào rửa sạch cũng có thể được làm lạnh trước sinh lý nước muối hoặc pH 8 Tris. -HCl, rửa một lần. Ngoài ra, liều siêu âm khác nhau rất nhiều với số lượng mẫu và vi khuẩn. Sức mạnh có thể đạt 400-600w, vượt quá 5s, dừng lại cho 5s, tắm đá, và thêm PMSF với nồng độ cuối cùng là 1 mM. Để xác định cường độ và tần số siêu âm thích hợp, cần phải quan sát việc kiểm tra bằng kính hiển vi bất kỳ lúc nào để xem liệu các tế bào có bị hỏng hoàn toàn hay không. Actinomycetes thuộc chi của vi khuẩn Gram dương với tỷ lệ mol cao (G + C) (mol%) trên cây phát sinh loài của hệ thống prokaryotic. Khi thực hiện siêu âm E. coli, máy nghiền bột siêu âm 400W được sử dụng, và phương pháp siêu 5 điểm dừng 5 là tốt, nhưng dường như không có tác dụng trên Streptomyces. Nó sẽ là do sự khác biệt trong thành phần thành tế bào, bởi vì E. coli là một vi khuẩn Gram âm.

Ảnh Proudct